Citologia

A Citopatologia é a área de atuação da Patologia que estuda as doenças a partir de observação ao microscópio de células obtidas por esfregaços, aspirações, raspados, centrifugação de líquidos e outros métodos. Praticamente todos os órgãos e tecidos podem fornecer material para o estudo citológico, permitindo exame rápido, pouco invasivo e não-traumático. As amostras celulares são dispostas em lâminas de vidro identificadas ou em frascos hermeticamente fechados e posteriormente coradas pela técnica de Papanicolaou ou outra.

Citologia Cérvico-vaginal - Preventivo - Exame de Papanicolaou

A citologia cérvico-vaginal tem sido o principal método de detecção e prevenção do câncer do colo do útero e estuda as células esfoliadas da junção escamo-colunar. Além da detecção de lesões pré-malignas e malignas, a citologia vaginal proporciona informações sobre o estado hormonal da paciente, assim como a presença de microrganismos patogênicos.

Método:

Os exames colpocitológicos estão sendo emitidos de acordo com os critérios determinados pela Conferência de Bethesda . Trata-se de nomenclatura internacional isenta de ambiguidade, mais precisa e com uma clara equivalência entre o diagnóstico citológico de uma lesão e seu correspondente histopatológico, de maneira a ser facilmente entendida pelo clínico.

Coleta do Material:

Para uma coleta adequada, os instrumentos que conseguem uma ótima amostragem de células são as espátulas para avaliação ectocervical e parede vaginal e escovas para avaliação de células endocervicais e da zona de junção. Hoje, a qualidade das células do esfregaço é mais importante que a quantidade de células. Colher material da parede vaginal, fundo de saco e ectocervical, colocando o material na metade de uma lâmina ou em uma lâmina inteira, tendo o cuidado de passar os dois lados da espátula no sentido longitudinal. Com a extremidade da escova endocervical, introduzi-la no canal endocervical, fazer um cuidadoso movimento circular, a fim de se conseguir material de toda área do canal, procurando traumatizar o mínimo possível, para não haver sangramento intenso. Colocar este material na outra metade de uma lâmina ou em outra lâmina inteira, no sentido longitudinal, girando levemente a escova para representar todo seu conteúdo no esfregaço.

Fixação:

A fixação deve ser feita imediatamente após a coleta usando fixador citológico (Solução Álcool Propilenoglicol) ou Álcool 96º.

Citologia Cérvico-vaginal em meio líquido

É o método de prevenção do câncer do colo uterino que permite a deposição do material coletado em uma única camada, tão fina quanto a própria espessura de uma célula. As células coletadas do colo uterino não são esfregadas em uma lâmina, e sim depositadas em um frasco contendo meio líquido conservante. Após a coleta da amostra, o frasco é encaminhado para o laboratório, e a amostra é processada eletronicamente através de um moderno equipamento.

Citologia Oncótica de Líquidos (Urina, Escarro, Derrames Pleurais, Líquor, Líquido Ascítico, Descargas, entre outros)

Compreende a análise das células presentes nos fluídos e secreções orgânicas, proporcionando informes valiosos para confirmar ou afastar o diagnóstico de determinadas doenças. Exige técnica adequada de colheita, com estreita correlação com dados clínicos. O médico citopatologista estuda a morfologia dos elementos celulares e a luz dos dados clínicos interpreta e registra os achados.

Material:

O líquido deverá ser colocado em um frasco hermeticamente fechado, ou em uma seringa, contendo um volume igual de álcool a 70%. A quantidade mínima de líquido biológico deverá ser 5 mL, sempre que for possível.

Método:

Concentração das células por citocentrifugação. Coloração de Papanicolaou.

Amostras inadequadas:

Volume insuficiente, fixação inadequada, não identificação do paciente, saliva em vez de escarro, proporção alta de sangue, líquido coagulado.

Punção Aspirativa por Agulha Fina - PAAF

A técnica de punção aspirativa com agulha fina (PAAF) é amplamente utilizada na investigação de tumores e outras lesões em órgãos superficiais (mama, pele, tireoide, linfonodos, glândulas salivares, etc.) ou profundos (pulmão, fígado, pâncreas, rim, etc.). São vantagens do método a simplicidade e o baixo custo da técnica, podendo ser realizado em consultório médico ou ambulatório. Algumas vezes, há necessidade de utilização de métodos de imagem (ultrassonografia, tomografia computadorizada) para mais precisa localização da lesão, especialmente em órgãos profundos. Os resultados podem distinguir tumores malignos de benignos ou reconhecer lesões inflamatórias, eventualmente, dispensando a realização de procedimentos cirúrgicos. Por outro lado, a confirmação do diagnóstico pode tornar-se necessária, em vários casos, em virtude das limitações do procedimento para estabelecer diagnóstico final.

Material:

Esfregaços fixados em alcool 95%, spray fixador ou a seco (ar).

Método:

Coloração por Giemsa e Papanicolaou, quando for indicado.

Amostras inadequadas:

Fixação inadequada, excesso de sangue, células insuficientes.

Imunofluorescência

Imunofluorescência Direta de Pele

“Padrão ouro” para o diagnóstico de doenças dermatológicas imunologicamente mediadas. É essencial para estabelecer o diagnóstico das dermatoses bolhosas (pênfigos, penfigoides, dermatose bolhosa por IgA linear, dermatite herpetiforme, epidermólise bolhosa adquirida). Pode ser útil para o diagnóstico das doenças do colágeno (por exemplo, lúpus eritematoso), das doenças inflamatórias da cavidade oral (líquen plano, doença de Behçet) e das vasculites. A interpretação dos resultados deve sempre ser correlacionada aos achados clínicos e histopatológicos para a conclusão diagnóstica.

Material:

Tecido fresco acondicionado em frasco contendo meio de transporte (solução de Michel), fornecido gratuitamente pelo Laboratório.

Metodologia:

Utiliza-se anticorpos fluorescentes específicos para o antígeno a ser pesquisado (Imunoglobulinas- IgA, IgG e IgM, C3 ou fibrinogênio).

Imunofluorescência direta de Rim

O exame de imunofluorescência direta (IFD) tem se mostrado indispensável para detecção de diferentes antígenos no tecido renal. Muitas doenças renais, particularmente as glomerulopatias, podem apresentar o mesmo padrão morfológico; por esse motivo, o exame de IFD é fundamental, fornecendo informações quanto à presença, os tipos e localizações de imunodepósitos. Depósitos de IgA, por exemplo, podem ser observados em pacientes portadores de lúpus eritematoso sistêmico, normalmente em conjunto com outras imunoglobulinas e frações de complemento. Entretanto, quando o depósito de IgA é isolado, esse achado é sugestivo de doença de Berger (nefropatia por IgA). A interpretação dos resultados deve ser sempre correlacionada com os achados clínico-laboratoriais e histopatológicos para completa definição diagnóstica.

Material:

Tecido renal a fresco, acondicionado em frasco contendo meio de transporte (solução de Michel), fornecido gratuitamente pelo Laboratório. Ressalta-se que, após a coleta do fragmento renal, o mesmo deve ser colocado imediatamente no meio de transporte, sem nenhum outro tipo de fixação prévia.

Metodologia:

Utiliza anticorpos fluorescentes específicos para os antígenos a serem pesquisados: imunoglobulinas (IgA, IgG e IgM) e frações de complemento (C3 e C1q). Em certas situações, poderão ser pesquisados também os anticorpos para cadeias leves de imunoglobulina kappa e lambda.

Imunohistoquímica

Informações gerais:

As técnicas de imunohistoquímica (IHQ) detectam moléculas (antígenos) teciduais, sendo de grande valor nos diagnósticos anátomopatológicos e na investigação científica. O mecanismo básico é o reconhecimento do antígeno por um anticorpo (Ac primário) associado a diversos tipos de processos de visualização. Atualmente há disponibilidade de grande número de anticorpos para uso em tecidos fixados em formol e incluídos em blocos de parafina, permitindo o estudo de blocos arquivados por longos períodos.

Material:

Este exame é realizado em material obtido por biópsia/ressecção cirúrgica, fixado em formol tamponado a 10%, B5 ou paraformaldeído, ou em fragmentos de tecidos incluídos em bloco de parafina, acompanhados da cópia do laudo original e de lâminas coradas.
     • Se o fixador não for formol a 10%, é importante saber a hora certa em que o material foi colocado em outro conservador (como Bouin, por exemplo).
     • O exame pode ser realizado em líquidos, esfregaços citológicos ou raspado de lesão, porém a reação imunohistoquímica em material citológico depende da avaliação prévia da qualidade da amostra.
     • Preferencialmente, o material deve ser enviado até 24 horas após a coleta.

Método:

A técnica de IHQ mais usada é a indireta, associada ao complexo avidina-biotina-enzima. O complexo é formado pela ligação de uma molécula de (strept) avidina com várias de biotina associadas a uma enzima (peroxidase ou fosfatase alcalina), que tem como função a conversão de um cromógeno incolor em um produto final que pode conferir diversas cores aos antígenos teciduais marcados. As cores mais comuns são a castanha (peroxidase+ diaminobenzidina-DAB) e a vermelha (fosfatase alcalina + fast red).

Amostras inadequadas:

Fixação inadequada e tardia.

Biologia Molecular

Kit para coleta: Citologia em base de meio líquido (Preventivo meio líquido)

HPV Alto Risco com genotipagem 16 e 18 (PCR – COBAS)

Grupo (31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,66 e 68)

Genotipagem HPV-PCR – 28 tipos

Baixo Risco: 06,11,40,42,43,44,54,61 e 70)

Alto Risco: 16,18,26,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,69,73 e 82

Painel IST 1 (Herpes I e II – Chlamydia trachomatis – Neisseria gonorrhoeae – Mycoplasma genitalium – Mycoplasma hominis – Ureaplasma urealyticum – Ureaplasma parvum – Streptococcus agalactiae – Candida Albicans – Trichomonas vaginalis) 21 agentes.

Painel IST 2 (Chlamydia trachomatis – Neisseria gonorrhoeae – Mycoplasma genitalium – Mycoplasma hominis – Trichomonas vaginalis – Ureaplasma urealyticum – Ureaplasma parvum) 7 agentes.

Painel IST 3 (Chlamydia trachomatis – Neisseria gonorrhoeae – Mycoplasma hominis – Ureaplasma urealyticum) 4 agentes.

Painel de Cândida – PCR: Candida albicans; Candida dubliniensis; Candida glabrata; Candida krusei; Candida lusitaniae; Candida parapsilosis; Candida tropicalis;

Painel de Úlcera Genital – PCR: Citomegalovírus; Haemophilus ducreyi; Vírus Herpes simples tipo 1; Vírus Herpés simples tipo 2; Lymphogranuloma venereum; Treponema pallidum; Vírus Varicella-zoster;

Painel de Vaginose Bacteriana – PCR: Atopobium vaginae; Bactérias associadas à vaginose bacteriana 2; Bacteroides fragilis; Gardnerella vaginalis; Lactobacillus spp; Megasphaera Tipo 1; Mobiluncus spp.

Perfil Trombofílico: PRC Tempo Real

Fator V de Leiden (G1691A)

Mutação de Protombina (G20210A)

Metilenotetrahidrofolato redutase, Mutação C677T

Metilenotetrahidrofolato, Mutação A1298c